新生儿产ESBLs肺炎克雷伯菌检测方法研究

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摘要：目的 对比新生儿室产ESBLs肺炎克雷伯菌检测方法，了解新生儿肺炎克雷伯菌的医院感染状况及耐药状况，为临床医学提供依据。方法 采用回顾性的方法，对新生儿产ESBLs肺炎克雷伯菌检测方法进行研究。结果 新生儿产ESBLs肺炎克雷伯菌感染在新生儿病房感染性疾病中占很高的比例。早产儿，低体质量儿，器械通气为新生儿感染的易患因素。结论 肺炎克雷伯菌特别是ESBLs菌株，已成为新生儿室病房感染的主要病原菌，及时准确的检测方法尤为重要。

关键词：新生儿 ESBLs；检测方法；分析

肺炎克雷伯菌特别是ESBLs菌株，已成为新生儿病房感染的主要病原菌，其比例增高以及耐药性增强应引起高度重视。该菌的耐药性不断增加，对大多数青霉素、头孢菌素类抗生素耐药。由于新生儿特别是早产儿、极低体质量儿的免疫功能低下及侵入性操作的不断开展，新生儿很容易感染该菌。给临床抗感染治疗造成极大困难，导致病程延长和死亡率升高。所以快速检测该菌并能给临床提供准确的药敏结果已迫在眉睫。利用纸片法和仪器法结合，使检测该菌的时间缩短8h，准确率提高至98%。预防和减少了产ESBLs肺炎克雷伯菌医院感染的发生，为抢救患者赢得了宝贵时间。

痰培养用一次性吸痰管吸取，大部分标本取自器械通气患儿管插管导管内。血标本取自严格消毒皮肤的股静脉，穿刺入80ml血液需氧瓶中。咽拭子、分泌物标本用生理盐水棉拭子取样。呼吸道标本接种血平板、巧克力平板、沙保弱琼脂平板、中国蓝琼脂平板，血标本置ESP血培养仪中进行连续培养和检测，报阳性后，接种血平板。其余分泌物接种血平板、巧克力平板、沙保弱琼脂平板、中国蓝琼脂平板。37℃孵育18～24h，该菌在血平板、中国蓝平板上生长良好，在沙保弱平板上不生长，挑取菌落革兰氏染色，显微镜下观察为革兰阴性杆菌，挑取菌落于营养琼脂平板划线，贴药敏纸片头孢他碇、头孢他碇/克拉维酸复合试剂、头孢噻肟/拉维酸复合试剂，37℃孵育，两者中任一抗生素在加克拉维酸后抑菌圈扩大5mm以上时，即判定ESBL阳性。挑取菌落，用TDR-300C全自动细菌鉴定仪及配套的GNI卡进行鉴定。见表1、表2。

目前，临床上大范围应用第3代头孢菌素，导致产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率逐年升高。临床研究指出，产ESBLs肺炎克雷伯菌对临床上常用的青霉素类、氨曲南以及头孢均素类抗生素均有较高耐药性。分析原因主要与产ESBLs株不仅携带ESBLs质粒，也携带氨基糖甙类、耐喹诺酮类等多种耐药基因[2]，因此产ESBLs肺炎克雷伯菌会出现多重耐药表现。本组资料显示，对环丙沙星的耐药率为0，这可能与此类药物在新生儿病房很少应用有关。这一现象也证明了广谱抗生素高频用于治疗感染会对致病菌产生选择压力，并导致其耐药性增加。

参考文献：

[1]黄彬，陈茶， 汤晓丽， 等. 肺炎克雷伯菌对喹诺酮类及氨基糖苷类耐药基因检测及耐药机制分析[J]. 中华医院感染学杂志， 2011， 21（1）：5-7.

[2]吴爱武.临床微生物学和微生物检验[M].第3版.人民卫生出版社，2012.

[3]刘卫国. 肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析[J]. 实用中医药杂志， 2011， 27（3）：192-193.

[4]刘运德，主编. 微生物学检验[M]. 人民卫生出版社，2003.

编辑/哈涛

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